Reverso Transcriptase de Foreasy M-MLV

Nova geração de Foreasy de enzima Foreasy de Transcriptase RT do reverso de M-MLV para a venda

Introdução de produto

O reverso Transcriptase de Foreasy M-MLV é um transcriptase reverso novo expressou nas bactérias projetadas Escherichia Coli usando a tecnologia genética da recombinação. É uma polimerase de DNA recombinante que sintetize uma costa complementar do ADN do RNA único-encalhado, do ADN, ou de um RNA: Híbrido do ADN. Não tem nenhumas atividade do RNase H, estabilidade forte, afinidade forte do RNA, e sensibilidade alta da detecção.

Componentes do produto:

Tipo

Armazenamento

Loja em -20±5℃ por 2 anos ou em -80℃ para o armazenamento a longo prazo.

Aplicação

síntese de u da primeira costa do cDNA para RT-PCR e tempo real RT-PCR

síntese do cDNA de u para clonar e expressão.

geração de u de pontas de prova etiquetadas do cDNA para microarrays.

análise do RNA da extensão da primeira demão de u

Definição da unidade

Uma unidade de M-MLV RT é a quantidade de enzima exigida para incorporar 1 nmole do dTTP [3H] no minuto 10 em 37°C usando (A) (descolamento) 25 oligo polis como a molde-primeira demão.

Condições da reação da unidade

Tris-HCl de 50 milímetros (pH 8,3), 40 milímetros de KCl, 6 milímetros de MgCl2, 1 milímetro DTT, 0,5 milímetros [3H] de dTTP, 0,1 milímetros poli (A), 0,1 milímetros (descolamento) 25 oligo, 0,1 mg/mL BSA, e enzima no µL 50 para o minuto 10 em 37°C.

Operação:

sintetize o primeiro cDNA da costa (o sistema de reação de 20 μL)

1. Estrutura de sistema do RT (as seguintes etapas devem ser executadas no gelo).

1,1 após ter degelado cada compoment, adicione-o ao tubo da reação na ordem da tabela de seguimento 1

Tabela 1:

1,2 após o sistema é preparado, mistura delicadamente e centrifugador momentaneamente, a seguir executam a reação do RT de acordo com o abaixo na tabela 2

Tabela 2

• Adicionando o reagente na ordem como a seguinte tabela 3 depois que fresco no gelo

Tabela: 3:

1,4 após o sistema preparado, misture delicadamente e centrifugue momentaneamente, executam então condições da reação do RT na tabela de seguimento 4

Tabela 4:

Nota: Ao usar a primeira demão aleatória, a reação deve ser pré-aquecida em 25°C por 10 minutos antes da reação da primeira etapa.

O procedimento acima é para a referência somente, e as condições reais da reação variam segundo a estrutura do molde, das primeiras demão, etc.

Depois que a reação é terminada, o produto da reação está colocado no gelo para experiências subsequentes diretamente; para o armazenamento a longo prazo, satisfaça para armazená-lo em -20°C ou em -80°C.