Jogos reversos RT II FÁCIL da transcrição do reagente de laboratório para gerar primeiros materiais da costa CDNA e reagente de laboratório do equipamento

Jogos reversos rápidos e altamente sensíveis RT II FÁCIL da transcrição do reagente de laboratório para gerar o cDNA da primeiro-costa

Aplicação do jogo

Usado diretamente para a análise quantitativa do PCR do tempo real da expressão genética.

Pode rapidamente e exatamente analisar quantidades de traço de RNA tais como vírus do RNA.

Transcrição reversa de moldes do RNA com estrutura secundária satisfeita ou complexa alta do GC.

Kit Component Information

2×RT ou-EasyTM mistura: Reverso Transcriptase de Foregene, inibidor do RNase, dNTPs, estabilizador, realçador, Optimizer e primeira demão reversa da transcrição (primeira demão aleatória, (descolamento) primeira demão ₁₈ oligo) com relação aperfeiçoada.

Tolerância da mistura do RT

O 2×RT ou-EasyTM a mistura mostraram uma tolerância muito alta aos sais do álcool e do guanidine após ter testado a análise. O RNA refinado no laboratório tem frequentemente resíduos dos sais do álcool e do guanidine, que têm um efeito inibitório forte na transcrição reversa, tendo por resultado o efeito reverso insatisfatório da transcrição ou a baixa eficiência reversa da transcrição. A tolerância de produtos fáceis da série de Foregene RT aos sais do álcool e do guanidine faz a transcrição reversa mais fácil e mais eficiente.

Análise da tolerância do álcool

Análise da tolerância de sal do guanidine

Preparação antes da operação

Recomenda-se fortemente que os usuários leem as instruções com cuidado antes de usar este jogo. Os jogos fáceis da série do RT são fáceis de operar, convenientes e rápidos, e as instruções fornecem o uso correto do jogo inteiro. Prepare por favor materiais e o equipamento experimentais necessários antes de usar.

Uma quantidade do RNA do molde

O RNA do molde deve preferivelmente ser extraído das amostras frescas ou ser armazenado em -80°C (repetiu a congelação e thawing do RNA deve ser evitado).

RT EasyTM II: (RNA do total 0.1pg-0.5μg ou sistema)/10μl de 0.01pg-0.05μg mRNA.

Amplificação não específica

1. Projeto ilógico da primeira demão.

Recomendação: Primeiras demão do projeto de acordo com princípios de projeto da primeira demão.

2. Resíduos Genomic.

Recomendações: Use um jogo reverso da transcrição como (gato. No. RH-01031) que contém primeiras demão do transporte-intron da ablação ou do projeto do genoma.

RT-QPCR nenhum sinal da amplificação

1. O RNA é degradado.

Recomendação: O material para a extração do RNA deve ser tão fresco como possível, e o RNA de alta qualidade e da alto-pureza deve ser usado.

2. O RNA contém inibidores.

Recomendação: Os inibidores reversos da transcrição incluem geralmente o SDS, os sais do guanidine, o EDTA, etc. Recomenda-se lavar o RNA precipita com álcool etílico de 70% para remover os inibidores.

3. Edições de projeto da primeira demão.

Recomendação: De acordo com o princípio de projeto da primeira demão, remodele as primeiras demão para a inspeção.

A faixa do alvo aparece no controle vazio

1. Contaminação de ferramentas ou de reagentes de funcionamento.

Recomendação: Todos os reagentes ou equipamento para a experiência devem ser esterilizados. Seja cuidadoso e delicado impedir que as amostras do ADN estejam tiradas na pipeta ou derramou fora do tubo de centrifugador.

2. A contaminação ocorreu durante a preparação do sistema de reação do PCR.

Recomendação: Tome precauções necessárias ao segurar, por exemplo: Luvas do látex do desgaste, pontas de filtro do uso. Use a mistura do PCR do tempo real em um sistema da contaminação-prova.

3. As primeiras demão são degradadas.

Recomendação: Use a eletroforese de SDS-PAGE para detectar se as primeiras demão estão degradadas, e substitua-a com as primeiras demão novas para experiências da detecção da fluorescência.