Lnc-RT HeroTM mim (com gDNase) Premix super para a síntese do cDNA da primeiro-costa do lncRNA Cat.No.RTL-09098/09099

Lnc-RT HeroTM eu (com gDNase)

Premix super para a síntese do cDNA da primeiro-costa do lncRNA

Cat.No.RTL-09098/09099

Descrição:

Lnc-RT HeroTM eu (com gDNase) sou um sistema reverso da transcrição desenvolvido especialmente para que o lncRNA remova rapidamente a contaminação genomic do ADN. a mistura 5×gDNase pode rapidamente remover o genoma restante no RNA em 42°C por 2 minutos, evitando eficazmente a interferência do genoma em resultados do qPCR.

A mistura de 5×L-RT HeroTM contém o reverso Transcriptase de Foregene LncRNA desenvolvido especialmente por Foregene, que é um novo tipo de transcriptase reverso especificamente para o lncRNA e outros moldes complexos do RNA longo, com afinidade mais forte do RNA e eficiência mais alta da gravação da reversão. O sistema aperfeiçoado faz a taxa reversa da transcrição mais rapidamente e pode facilmente transcrever moldes do RNA com índice alto do GC e estrutura secundária complexa. A primeira síntese do cDNA da costa pode ser terminada em 42°C em 15 minutos.

Especificações:

25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns

Componentes do jogo

Informação componente dos jogos

Mistura de -5×gDNase: gDNA que remove o agente, é necessário usar o reagente de acordo com as instruções de funcionamento antes da reação do RT é executado (o índice interno do glicerol não pode ser congelado, e não pode ser congelado, que pertence aos fenômenos normais).

- MISTURA DE 5×L-RT HEROTM: Contém o reverso Transcriptase de Foregene Lncrna, o inibidor do RNase, DNTPS, Stabilifer, realçador, Optimizer, (descolamento) primeira demão 18 oligo).

Features&advantages:

- Capacidade eficiente para remover o gDNA, que pode remover o gDNA no molde dentro de 2 minutos.

- Pode eficientemente inverter a transcrição do lncRNA. Quando o produto reverso da transcrição é sujeitado ao qPCR, o valor do Ct é mais baixo do que aquele do sistema reverso convencional da transcrição.

- Sistema reverso eficiente da transcrição, toma somente 15 minutos para terminar a síntese do primeiro cDNA da costa.

- Moldes complexos: os moldes com índice alto do GC e estrutura secundária complexa podem igualmente ser invertidos com eficiência elevada.

- o sistema reverso da transcrição da Alto-sensibilidade, moldes do página-nível pode igualmente obter o cDNA de alta qualidade.

- O sistema reverso da transcrição tem a estabilidade térmica alta, a temperatura ótima da reação é 42℃, e ainda tem o bom desempenho reverso da transcrição em 50℃.

Exigências do RNA do molde

É o melhor usar o RNA extraiu das amostras frescas ou preservado em -80 °C.

- Integridade do molde: boa integridade, nenhuma degradação.

- Pureza do molde: Os ÍONS, as proteínas, o EDTA, o álcool etílico, os fenóis e outros jornais contidos no RNA afetarão para inverter a atividade do transcriptase e para afetar finalmente efeitos reversos da transcrição.

Dosagem do RNA do molde

- Para o lncRNA: sistema total do μl RNA/20 do μg 10ng-1.

- Para o RNA geral: RNA do μg 0.1pg-1 ou 0.01pg-0.1 sistema total do μl do μg mRNA/20.

Informação componente dos jogos

- mistura 5×gDNase: gDNA que remove o agente, é necessário usar o reagente de acordo com as instruções de funcionamento antes da reação do RT é executado (o índice interno do glicerol não pode ser congelado, e não pode ser congelado, que pertence aos fenômenos normais).

- MISTURA DE 5×L-RT HEROTM: Contém o reverso Transcriptase de Foregene Lncrna, o inibidor do RNase, DNTPS, Stabilifer, realçador, Optimizer, (descolamento₎ primeira demão ₁₈ oligo).

Precauções: (Leia por favor as precauções com cuidado antes de usar o jogo)

- O molde recomenda usar amostras frescas ou o RNA preservou sob -80 o ° C (o RNA deve evitar a gelo-aproximação amigável repetida, não assegurando a integridade do RNA, a nenhuma degradação).

- A fim evitar a poluição do RNASE, a operação experimental é realizada no espaço RNase-livre; a cabeça da arma e o centrifugador do PCR devem ser garantidos para ser RNASE-livres; e vista luvas descartáveis e máscaras.

- Antes de usar, a MISTURA da mistura de GDNase de 5 × e 5 do × L-RT HEROTM é colocada no gelo para fazê-lo derretida completamente, e a bala clara é misturada; o sistema é formulado, opera-se por favor em um banho de gelo para melhorar o desempenho do jogo, melhora o desempenho da especificidade da amplificação do PCR do jogo.

- 5 a MISTURA do × L-RT HEROTM adicionou uma primeira demão reversa aperfeiçoada da transcrição da relação sem adicionar nenhumas primeiras demão às primeiras demão adicionais adicionais.

- Para o molde complexo do RNA da estrutura secundária, a temperatura da reação pode ser aumentada 50 ao ° C

Trabalhos:

Armazenamento e vida útil:

Os jogos super do PCR do Premix devem ser armazenados em -20°C. armazenam o produto em um refrigerador da temperatura constante em -20°C imediatamente depois do recibo. Se as condições de armazenamento são apropriadas, o produto não degradará nenhum desempenho durante o período de uma validez de 1 ano.

Guia da análise de problema

O seguinte é uma análise dos problemas que podem ser encontrados no uso de Lnc-RT HeroTM mim (com gDNase) jogos da série, esperando ser útil a suas experiências. Além, nós dedicamos o suporte laboral para ajudá-lo com outros problemas experimentais ou técnicos além das instruções e das perguntas de funcionamento. Se você tem quaisquer necessidades, contacte-nos por favor: 028-83361257 ou e-mail: Tech@foregene.com.

Amplificação não específica

1. Projeto ilógico da primeira demão

Recomendação: Primeiras demão do projeto de acordo com princípios de projeto da primeira demão.

2. Resíduos do genoma.

Sugestão: Certifique-se de que a primeira etapa da temperatura da reação da remoção do gDNA é 42°C, e o tempo de reação pode igualmente ser prolongado a 5min.

Nenhum sinal da amplificação pelo RT-qPCR

1. O RNA é degradado.

Recomendação: O material para a extração do RNA deve ser tão fresco como possível, e o RNA de alta qualidade e da alto-pureza deve ser usado.

2. O RNA contém inibidores.

Recomendação: Os inibidores reversos da transcrição incluem geralmente o SDS, os sais do guanidine, o EDTA, etc. Recomenda-se lavar o RNA precipita com álcool etílico de 70% para remover os inibidores.

3. Edições de projeto da primeira demão.

Recomendação: De acordo com o princípio de projeto da primeira demão, remodele as primeiras demão para a inspeção.

A faixa do alvo aparece no controle vazio

1. Contaminação de ferramentas ou de reagentes de funcionamento.

Recomendação: Todos os reagentes ou equipamento para a experiência devem ser esterilizados. Seja cuidadoso e delicado ao segurar para impedir que as amostras do ADN estejam sugadas na pipeta ou derramou fora do tubo de centrifugador.

2. A contaminação ocorreu durante a preparação do sistema de reação do PCR.

Recomendação: Tome precauções necessárias ao segurar, como: luvas vestindo do látex, usando pontas de filtro. Use a mistura do PCR do tempo real em um sistema da contaminação-prova.

3. As primeiras demão são degradadas.

Sugestão: Use a eletroforese de SDS-PAGE para detectar se as primeiras demão estão degradadas, e substitua-a com as primeiras demão novas para experiências da detecção da fluorescência.