Jogo direto I-UNG do PCR da semente da planta para as sementes da planta que contêm baixos componentes do polisacárido e do polyphenol

Descrição:

O jogo direto I-UNG do PCR da semente da planta usa um sistema de reação original do lysis, que possa rapidamente liberar o ADN genomic das amostras da semente da planta com baixo índice do polisacárido e do polyphenol (como: o arroz, o trigo, o cigarro, o milho, os feijões de soja, etc.) para o uso em reações do PCR, assim que são testes genéticos em grande escala particularmente apropriados. A fim encontrar as necessidades de testes diferentes da detecção, este jogo pode usar tipos múltiplos de amostras (tais como sementes inteiras, cortes pequenos do tecido, ou para moer amostras de sementes múltiplas) para experiências. Entre elas, para as amostras da semente que ainda precisam de ser germinadas, você pode escolher cortar os cortes do micro-tecido (1-5mg) a não ser o embrião da semente para a experiência; para as experiências que precisam de ser provadas em um grande número amostras, você pode escolher misturar amostras múltiplas e combiná-las. Após a moedura em partículas com um diâmetro de aproximadamente 0.5mm, a experiência pode ser realizada (pelo menos 0,1% da amostra do alvo podem ser detectadas).

O processo de liberar o ADN genomic do sistema de reação da segmentação pode ser terminado dentro de 5-10 minutos. Não há nenhuma necessidade para que outros processos removam a proteína, o RNA ou os metabolitos secundários, e as quantidades de traço liberadas de ADN podem ser usadas como um molde para reações do PCR.

A mistura do PCR EasyTM da semente 2× tem a tolerância forte aos inibidores da reação do PCR, e pode diretamente usar a mistura do lysis de plantas como um molde para a amplificação eficiente e específica. Este reagente contém a polimerase de ADN do D-Taq da empresa, os dNTPs, o MgCl2, o amortecedor da reação, da reação do PCR realçador, optimizer, e estabilizador alterado especialmente para o PCR direto. Usado conjuntamente com o sistema de reação do lysis pode rapidamente e facilmente detectar amostras, e tem as características da sensibilidade alta, da especificidade forte, e da boa estabilidade.

A mistura do PCR EasyTM da semente 2× (UNG) usa o dUTP em vez do dTTP com base na mistura do PCR EasyTM da semente 2×, e adiciona a enzima de UNG (uracil-N-GLYCOSYLASe) que pode degradar o molde que contém o dUTP ao mesmo tempo. Antes da reação do PCR, a enzima de UNG é usada para degradar o produto do PCR que contém o uracil. A enzima de UNG não terá nenhum efeito no molde que não contém o uracil, desse modo assegurando a especificidade e a precisão da amplificação e impedindo a possibilidade de testes genéticos em grande escala. A contaminação de produtos do PCR ocorreu

A polimerase de ADN de D-Taq é uma polimerase de ADN desenvolvida especialmente por Foregene para reações diretas do PCR. A polimerase de ADN de D-Taq tem a tolerância forte a uma variedade de inibidores da reação do PCR, e pode eficientemente amplificar quantidades de traço de ADN em vários sistemas de reação complexos, e a velocidade da amplificação pode alcançar 2Kb/min, que é especialmente apropriado para a reação do PCR Direct.

De acordo com as diferenças em amostras da planta, os produtos são divididos em duas categorias: PCR direto direto da semente do jogo e da planta do PCR da semente da planta mais o jogo. Na fase do lysis, considerar que os tipos diferentes de sementes ou de materiais do tecido variam extremamente na quantidade de reagentes usados no processo do lysis, clientes pode escolher a semente direta correspondente do jogo ou da planta do PCR da semente da planta (pequena e média) (grande) de acordo com o tamanho de seu jogo direto do PCR dos materiais experimentais; na fase da detecção do PCR, os clientes podem igualmente escolher a mistura do PCR ordinário EasyTM da mistura ou da semente 2× do PCR EasyTM da semente 2× (UNG) que pode impedir a contaminação de produtos da amplificação do PCR de acordo com as necessidades experimentais.

Especificações:

50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, rxns 2000×20µl

Componentes do jogo:

Features&advantages:

- A purificação demorada e cara de nenhuma necessidade do ADN é exigida.

- A procura da amostra é pequena, apenas toma uma única semente.

- Nenhum tratamento especial tal como a moedura e o esmagamento é exigido, e a operação é simples.

- O sistema aperfeiçoado do PCR permite o PCR de ter uma especificidade mais alta e uma tolerância mais forte aos inibidores da reação do PCR.

- A mistura antipoluição do PCR EasyTM da semente do sistema 2× do PCR (UNG) pode eficazmente eliminar a poluição causada por produtos do PCR e assegurar a especificidade e a precisão da amplificação.

Parâmetros do jogo:

Aplicação: Identificação de plantas transgênicas, de genotyping, etc.

Amostra: Sementes ou tecidos da planta com baixo índice do polisacárido e do polyphenol.

Tamanho da amostra: Única semente inteira, tecido de planta 1-100mg

Escala da detecção: Produto ≤1kb do PCR

Aplicação

- Espaço de aplicação: uma variedade de sementes da planta.

- O ADN liberou-se do lysis da amostra: usado somente como um molde do PCR.

- O jogo pode ser usado para as seguintes finalidades: identificação de sementes transgênicas, de planta que genotyping, etc.

Informação da composição do jogo

- Amortecedor SP1: Fornece o ambiente exigido para a reação do lysis de sementes da planta.

- Amortecedor SP2: Neutralize o lysate de modo que não afete a reação subsequente do PCR.

Mistura do PCR EasyTM da semente de -2× (UNG): Contém a polimerase de ADN alterada especial de Taq, a enzima de UNG, os dNTPs, o dUTP, o MgCl2, o amortecedor da reação, da reação do PCR realçador, optimizer e estabilizador, etc. Durante a reação do PCR, apenas adicione a mistura, as primeiras demão, e o ddH2O apropriados do lysis à mistura do PCR EasyTM da semente 2× (UNG) a ser usada para a reação do PCR.

Amortecedor de carregamento do ADN de -6×: O amortecedor de carregamento não contém o SDS. Recomenda-se usar o amortecedor de carregamento do ADN 6× incluiu com o jogo ao executar a eletroforese do gel do agarose a fim obter bons resultados da eletroforese. Não use o amortecedor de carregamento que contém o SDS, se não haverá uma grande cauda da luz brilhante na pista durante a eletroforese, que afetará os resultados experimentais.

Fluxo de trabalho:

Electropherogram:

Armazenamento e vida útil:

- A parte I deste jogo deve ser armazenada na temperatura ambiente ou no 2-8℃.

o amortecedor SP1 dos vReagents, amortecedor SP2, amortecedor de carregamento do ADN 6×, sob circunstâncias secas, pode ser armazenado por 12 meses. Se você precisa de armazenar o jogo por um tempo mais longo, você pode armazená-lo em 2-8℃.

- A parte II deste jogo deve ser armazenada em -20℃.

mistura fácil do PCR da semente 2× vReagent, se usado frequentemente, pode igualmente ser armazenado em 4℃ para o armazenamento a curto prazo (para se usar acima no prazo de 10 dias).

APÊNDICE I

A comparação entre o PCR direto e o PCR tradicional: