PCR direto da folha da planta mais a folha da planta do amortecedor do Lysis da polimerase de ADN do jogo do PCR do jogo UNG para plantas transgênicas

PCR direto da folha da planta mais a folha da planta do amortecedor do lysis da polimerase de ADN do jogo do PCR do jogo-UNG para plantas transgênicas

Descrição:

O PCR direto da folha da planta mais o jogo-UNG adota um sistema original do amortecedor do lysis, que possa rapidamente liberar o ADN genomic das amostras da folha de plantas com índice alto do polisacárido e do polyphenol (tal como o algodão, a banana, etc.) para a reação do PCR. As folhas não precisam de ser moídas ou shredded quando tratadas com o amortecedor do lysis, fazendo os ideais para testes genéticos em grande escala.
O processo de liberar o ADN genomic do amortecedor do lysis pode ser terminado dentro de 5-10 minutos, sem a necessidade para outros processos de desproteinização, de RNA ou de metabolitos secundários, e o ADN liberado do traço pode ser usado como um molde para a reação do PCR.
A mistura do PCR EasyTM da folha 2× tem uma resistência forte aos inibidores da reação do PCR, e pode diretamente usar o produto de segmentação da planta como um molde para a amplificação eficiente e específica. O reagente contém a polimerase de ADN de D-Taq, os dNTPs, o MgCl2, o amortecedor da reação, da reação do PCR realçador, optimizer, e estabilizador projetados especialmente para reações diretas do PCR. Pode ser usado em combinação com o lysate direto para detectar rapidamente e facilmente amostras, e tem as características da sensibilidade alta, da especificidade forte e da boa estabilidade.
A mistura do PCR EasyTM da folha 2× (UNG) substitui o dTTP com o dUTP com base na mistura do PCR da folha 2×, e adiciona ao mesmo tempo a enzima de UNG (racil-N-glycosylase) que pode degradar o molde que contém o dUTP. Antes da reação do PCR, o produto do PCR que contém o uracil é degradado pela enzima de UNG. A enzima de UNG não terá nenhum efeito no molde que não contém o uracil, para assegurar a especificidade e a precisão da amplificação e impedir a possibilidade de testes genéticos em grande escala. Os problemas de contaminação do produto do PCR levantam-se.
A polimerase de ADN de D-Taq é uma polimerase de ADN tornou-se especialmente para reações diretas do PCR. A polimerase de ADN de D-Taq tem a tolerância forte a uma variedade de inibidores da reação do PCR, e pode eficientemente amplificar quantidades de traço de ADN em vários sistemas de reação complexos. A velocidade da amplificação pode alcançar 2Kb/min. É especialmente apropriado para a reação do PCR Direct.
De acordo com as diferenças de amostras da planta, os produtos são divididos em duas categorias: PCR direto direto da folha do jogo e da planta do PCR da folha da planta mais o jogo para polisacáridos e polyphenols; na fase da detecção do PCR, pode ser de acordo com as necessidades experimentais, para escolher a mistura comum do PCR EasyTM da folha 2× ou os 2× folheiam a mistura do PCR EasyTM (UNG) que tem o efeito de impedir a contaminação de produtos da amplificação do PCR.

Especificações:

50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, rxns 2000×20µl

Componentes do jogo:

Características & vantagens:

- Nenhuma purificação demorada e cara do ADN

- Menos material

- A amostra simples- pode ser sujeitada à reação do PCR ou à reação do lysis sem cortar ou moer

tempo de preparação dediminuição dos erros de carga da amostra de -2X e do sistema de reação

- a preparação do Rápido-molde pode ser terminada em 10 minutos, reação do PCR pode ser terminada em 50 minutos

- A reação alta do taxa de transferência-lysis pode ser terminada na placa boa do PCR 96

Parâmetros do jogo:

Aplicação: Identificação de plantas transgênicas, de genotyping, etc.

Amostra: folhas da planta

Tamanho da amostra: Diâmetro 2-3mm (método direto), diâmetro 5-7mm (método do lysis)

Escala da detecção: Produto ≤1kb do PCR

Kit Component Information

- Amortecedor PS1: Fornece o ambiente exigido para a reação do lysis da folha da planta.

- Amortecedor PS2: O suplemento fornece o ambiente exigido para a reação do lysis dos polisacáridos e dos polyphenols nas folhas da planta.

- Amortecedor P2: Neutraliza o lysate de modo que não interfira com as reações subsequentes do PCR.

- Mistura do PCR EasyTM da folha 2× (UNG): Com base na mistura do PCR EasyTM da folha 2×, o dUTP é usado para substituir o dTTP, e ao mesmo tempo, a enzima de UNG que pode degradar o molde que contém o dUTP é adicionada, que pode eficazmente impedir a contaminação de produtos da amplificação do PCR. Contém a polimerase de ADN de D-Taq alterada especialmente por Fuji bio, por UDG, por dNTPs, por MgCl2, por amortecedor da reação, por reação do PCR realçador, optimizer e estabilizador. Para a reação do PCR, apenas adicione a mistura do lysis, as primeiras demão apropriadas, ddH2O à mistura do PCR EasyTM da folha 2× (UNG) e pode ser usada para a reação do PCR.

- Amortecedor de carregamento do ADN 6×: Este amortecedor de carregamento não contém o SDS. Recomenda-se usar o amortecedor de carregamento do ADN 6× forneceu com o jogo ao executar a eletroforese do gel do agarose a fim obter bons resultados da eletroforese. Não use o amortecedor de carregamento que contém o SDS, se não haverá uma grande cauda da luz na pista nadadora durante a eletroforese, que afetará os resultados experimentais.

Fluxo de trabalho:

Electropherogram:

Armazenamento e vida útil:

A parte I deste jogo deve ser armazenada na temperatura ambiente ou no 2-8℃.

- Os reagentes protegem P1, amortecedor P2, amortecedor 6×DNA de carregamento podem ser armazenados por 12 meses sob circunstâncias secas; se necessário ser armazenado por um tempo mais longo, os reagentes podem ser armazenados em 2-8℃.

A parte II deste jogo deve ser armazenada em -20℃.

- Os reagentes protegem 2×Leaf a mistura do PCR EasyTM, se usados frequentemente, podem igualmente ser armazenados em 4℃ para o armazenamento a curto prazo (para se usar acima no prazo de 10 dias).