Introdução:
As moléculas do RNA podem interagir extensivamente com outras moléculas biológicas, tais como a proteína, ADN e RNA, e existem assim nas pilhas e nos organismos sob a forma dos complexos macromoleculares. Entre elas, os complexos da RNA-proteína são a existência e a função do RNA um dos formulários importantes de. O RNA suspenso é um método clássico para selecionar e identificar moléculas do RNA, especialmente as proteínas de interação de moléculas do lncRNA, e é reconhecido pela maioria dos pesquisadores e de jornais acadêmicos competentes internacionais. Hoje FORREGENE compartilhará com você do princípio experimental e processo técnico de RNA suspenso, talvez você pode usá-lo
1. O princípio experimental de RNA puxa para baixo a tecnologia:
In vitro a transcrição e a síntese do lncRNA do alvo ou dos fragmentos biotina-etiquetados do lncRNA (que incluem os fragmentos do RNA usados como controles positivos e negativos), e incubam com extratos da pilha; o uso avidin-ancorou grânulos magnéticos para recolher a RNA-proteína ou os complexos de RNA-RNA, após a lavagem completa, o complexo eluted. Se detectando a molécula do alvo da proteína que interage com o lncRNA, execute a eletroforese da proteína na RNA-tração abaixo do produto, para detectar a proteína do alvo pela mancha de prata, e para cortar o gel para a espectrometria maciça; também diretamente para executar a verificação ocidental da mancha no produto suspenso; se detectado para as moléculas do alvo do RNA que interagem com o lncRNA, a RNA-tração abaixo dos produtos é sujeitada à extração do RNA e a detecção qRT-PCR específica é executada.
2. O RNA puxa para baixo o processo da experiência da tecnologia:
Cultura celular
Preparação do total da pilha/extrato nuclear/do plasma proteína
O RNA puxa para baixo a experiência
Eletroforese de SDS-PAGE, mancha de prata
Espectrometria maciça e experiências da WB
Relatório experimental
A seguinte figura mostra que os resultados do Bio-bio RNA das FJ puxam para baixo e da eletroforese de SDS-PAGE a detecção, em que a seta vermelha marca a faixa de diferença:
O grupo de investigação de professor Song Xu da universidade de Sichuan acumulou 15 anos de acumulação a longo prazo no campo da pesquisa do lncRNA. Foregene grupo de investigação bio e do professor Song Xu cooperou para lançar o RNA puxa para baixo a tecnologia do lncRNA, que lhe dará um resultado satisfatório para sua experiência.
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