PCR quantitativo da fluorescência

O irmão, a transcrição reversa é terminado, e finalmente a última etapa - PCR quantitativo fluorescente! Hey, o irmão, o que é PCR quantitativo do tempo real?

PCR que você sempre sabe, endireita?

Você sabe, PCR é a reação em cadeia da polimerase, e é uma tecnologia que aumente o ADN!

É quase… É um método técnico para amplificar a sequência do alvo a mais de um milhão de vezes através das primeiras demão específicas, mas este indica somente a presença ou a ausência da sequência do alvo, e não pode determinar a quantidade do molde inicial. O PCR quantitativo da fluorescência é um método técnico desenvolvido para resolver este problema. PCR do tempo real e PCR da quantidade (qPCR) geralmente para referir-lhe.

A diferença das mentiras ordinárias do PCR na quantificação da fluorescência?

Sim, isto é, na fase da extensão de cada ciclo do PCR, a intensidade do sinal da fluorescência é detectada, e a quantidade inicial do molde pode ser calculada de acordo com a mudança da intensidade do sinal.

Sente tão complicado! Eu tenho que calcular este por mim mesmo?

Isto exige-o aprender lentamente, ele é o melhor poder compreender o princípio. Agora você pode centrar-se sobre o valor do CT primeiramente, que é dados experimentais relativamente intuitivos, e seu tamanho corresponde ao tamanho da quantidade inicial do molde. Há igualmente uns gráficos tais como curvas da amplificação e curvas de derretimento. Têm a palavra final sobre se sua experiência é bem sucedida ou não.

Oh, irmão. Então eu estou indo fazer a experiência do qPCR!

Pague a atenção especial para não adicionar moldes à área do reagente, se não sua mistura não utilizada será contaminada facilmente!

Obteve-o!